2021年05月28日 10:04:41 来源:上海雅吉生物科技有限公司 >>进入该公司展台 阅读量:53
产品简介
本试剂盒采用可以特异性结合DNA的离心吸附柱和缓冲液系统,提取干血斑中的基因组DNA。离心吸附柱中采用的硅基质材料为本公司新型材料,高效、专一吸附DNA,可去除杂质蛋白及细胞中其他有机化合物。提取的基因组DNA片段大,纯度高,质量稳定可靠。使用本试剂盒回收的DNA可适用于各种常规操作,包括酶切、PCR、荧光定量PCR,文库构建、Southern blot等实验。
产品特点
样本广泛:可从多种类型干血斑中直接提取基因组DNA。
高 质 量:*的裂解缓冲体系,纯化的DNA具有高浓度,高纯度,完整性好等特点,满足芯片杂交,高通量测序等实验需求。
快速低毒:采用硅胶膜吸附原理,无需酚/氯仿,1h内即可完成实验。
储存条件
该试剂盒置于室温(15-25℃)干燥条件下,可保存12个月,更长时间的保存可置于2-8℃。2-8℃保存条件下,若溶液产生沉淀,使用前应将试剂盒内的溶液在室温放置一段时间,必要时可在37℃水浴中孵育10 min,以溶解沉淀。
注意事项 请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项
· 若缓冲液GA或GB中有沉淀,可在37℃水浴中重新溶解,摇匀后使用。
· 溶液使用后应将瓶盖拧紧,避免蒸发。
· 所有离心步骤均在室温下离心。
· 若溶液与皮肤、粘膜接触,请立即用自来水冲洗,对操作者不会造成伤害风险。
实验例
操作步骤
使用前请先在缓冲液GD和漂洗液PW中加入无水乙醇,加入体积请参照瓶上的标签。
1. 取三片3×3 mm的干血斑样品到1.5 ml的离心管(自备)中。
2. 加入200 µl的缓冲液GA。
3. 加入20 µl Proteinase K溶液,涡旋震荡10 sec混匀后,放入预热至56℃的恒温震荡器中,
900 rpm恒温震荡1 h。
4. 短暂离心,加入200 µl的缓冲液GB,震荡10 sec充分混匀。将离心管放入预热至70℃的
恒温震荡器中, 900 rpm恒温震荡10 min。孵育结束后简短离心以去除管盖内壁的液滴。
注意: 加入缓冲液GB时可能会产生白色沉淀,一般70℃放置时会消失,不会影响后续实
验。如溶液未变清亮,说明细胞裂解不*,可能导致提取DNA量少和提取出的DNA不
纯。
5. 加入100 µl的无水乙醇。如果室温超过25℃,请将乙醇置冰上预冷。轻轻颠倒混匀样品,
室温放置5 min,简短离心以去除管盖内壁的液滴。
6. 将上一步所得溶液都加到一个吸附柱CR2中(吸附柱放入收集管中),12,000 rpm
(~13,400×g)离心30 sec,弃收集管废液,将吸附柱CR2放回收集管中。
7. 向吸附柱CR2中加入500 µl缓冲液GD(使用前请先检查是否已加入无水乙醇),12,000
rpm (~13,400×g)离心30 sec,弃收集管废液,将吸附柱CR2放回收集管中。
8. 向吸附柱CR2中加入700 µl 漂洗液PW(使用前请先检查是否已加入无水乙醇),12,000
rpm (~13,400×g)离心30 sec,弃收集管废液,将吸附柱CR2放回收集管中。
9. 向吸附柱CR2中加入500 µl 漂洗液PW,12,000 rpm (~13,400×g)离心30 sec。弃收集管
废液。