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大鼠、小鼠心脏干细胞(祖细胞)分离培养方法

2021年06月21日 09:04:17      来源:上海雅吉生物科技有限公司 >>进入该公司展台     阅读量:51

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心脏病是引起人类死因的一种代表性疾病,如果失去了心肌细胞,就会引起心力衰竭等心脏疾病。心肌细胞几乎没有再生能力,一旦失去就不能再生。从前认为心脏当中没有干细胞,所以心肌没有再生能力,但是近年的研究表明,成体心脏内部也会存在一些心肌干细胞。公司开发出一种新型心肌干细胞培养方法,希望能为这项研究的科学工作者提供帮助。

     

       细胞培养操作:
       1.摘取出心脏,去掉心脏包膜,把心尖部分剪下来(心尖部分是心室部分,心肌细胞含量高)。
       2.剪碎,移入15或50ml离心管中,用PBS多洗几遍,尽量把血细胞洗掉。
       3.加入2-3ml的50%血清+50%IMDM培养基,37℃、一小时浸泡。
       4.采用贴块法:用枪把组织块连同培养基一同移入T25瓶中,然后用枪吸出培养基。在培养箱中放置1-2小时,待组织粘贴在瓶底后,加入3ml含20%血清的IMDM培养基。
       5.在贴块培养到第三、四天时,从组织块上会脱落一些细胞团和单个细胞,收集到15ml离心管中。
       6.采用300rpm离心(或自然沉淀),去上清,取沉淀部分的细胞培养(多为细胞团)。
       7.用IMDM/DMEM/F12*培养基培养:10%血清、30%IMDM、60%DMEM/F12、0.1mM β-ME、50xB27、20ng/ml bFGF、10ng/ml EGF。
       8.细胞团中的细胞在第二天就会出现圆形扩散生长(呈集落生长,像太阳发光的模样),细胞形态不像成纤维细胞那样呈梭形状,而是有些偏圆。

       9.心脏干细胞生长速度很快,两三天就能长满。

 

 

    一站式细胞解决方案

    针对基础及临床研发中的原代细胞和iPS细胞的实验,由于原代细胞的分离和培养难度大,iPS细胞制作和分化的实验操作复杂,除长期进行原代和iPS培养工作的实验室,想要获得足够量的状态好的细胞比较困难。

    依靠多年在细胞培养方面的积累,为客户提供完整的细胞CRO解决方案。根据客户需求,直接在细胞水平进行药物或者试剂的刺激,观察细胞状态的变化或者特定通路上mRNA或蛋白的变化,也可以先制作动物模型,对动物进行处理后,分离特定的原代细胞进行需要的检测。

    同时,我们可以依照客户提供的具体实验方案进行操作,也可以根据客户要求进行实验设计,并根据客户实验的规模和难度提供详细的报价和实验周期规划。

 

服务项目:

 

 

服务流程:

    1.联系我们,沟通客户实验计划及目标,评估实验的的可行性。    

    2.依照客户要求,设计相应的实验;或客户已有实验方案发送给我们,我们研究方案的可操作性。    

    3.确定最终的实验方案,报价和周期。    

    4.签订服务合同,支付预付款。    

    5.开始实验服务,并定期向客户反馈和交流。    

    6.实验完成,提供完整实验说明和部分实验结果。    

    7.支付尾款,向客户提供完整的全部实验报告和原始数据。    

    8.项目完成。

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