产品简介
本试剂盒采用具有*分离作用的磁珠和*的缓冲液系统,从血液、唾液、口腔拭子和动物组织等样品中分离纯化高质量基因组DNA。*包埋的磁珠,在一定条件下对核酸具有很强的亲和力,而当条件改变时,磁珠释放吸附的核酸,能够达到快速分离纯化核酸的目的。整个操作过程安全便捷,提取的基因组DNA片段大,纯度高,质量稳定可靠,尤其适合高通量工作站的自动化提取。使用本试剂盒纯化的DNA适用于各种常规操作,包括酶切、PCR、荧光定量PCR、文库构建、Southern杂交、芯片检测和高通量测序等实验。
产品特点
• 简便快捷:1 h内即可获得超纯的基因组DNA
• 高 通 量:可整合移液法自动化仪器和磁棒法自动化仪器进行高通量提取实验
• 安全无毒:无需酚/氯仿等试剂
• 纯 度 高:获得的DNA纯度高,可直接用于芯片检测、高通量测序等实验
实验例
图例:按说明书操作对唾液等样本进行DNA 纯化,洗脱体积100 μl,上样2 μl,1%琼脂糖凝胶电泳,6 v/cm电泳20 min电泳结果。
M:TIANGEN Marker D2000
E. 干血斑样本 1. 样本处理: 向1.5 ml离心管中加入3-10片3×3 mm的干血斑样品,加入200- 400 µl的组织消化液GHA和20 µl 蛋白酶K溶液。干血斑片数 缓冲液GHA加入量 3 片 200 µl 5片 300 µl 10 片 400 µl 2. 涡旋震荡10 sec混匀后,放入预热至75℃的恒温震荡器中,1,500 rpm恒温振荡裂解45 min。注意:当样本数目比较大时,可以将组织消化液GHA和Proteinase K按比例预先混合,现用现配。 3. 加入300 μl裂解液GHL和300 μl异丙醇,振荡混匀。 4. 加入15 μl磁珠悬浮液GH,振荡混匀1 min,共静置9 min,每3 min振荡混匀1 min。注意:为了确保磁珠*重悬,请在使用前振荡混匀。 5. 将离心管放置于磁力架上静置30 sec,磁珠*吸附后,小心吸去液体。 F. 组织样本 1. 样本处理: 取动物组织10-50 mg,尽量剪成小块,加入300 μl组织消化液GHA和20 µl Proteinase K,使用电动匀浆机研磨约20 s至组织研磨充分。 1) 对于匀浆充分的样本可以省去65℃消化的时间; 2) 对于有肉眼可见组织块的样本,建议65℃消化30 min至消化*; 3) 对于鼠尾样本,56℃消化过夜; 4) 对于含毛囊的毛发和羽茎类样本,补加20 µl 1M DTT(自备),消化60 min 至过夜。
注意:样本消化完成后,如果有组织碎片,建议12,000 rpm离心1 min去除残留杂质。
如果需要去除RNA,加入4 μl RNase A室温放置10 min(TIANGEN,RT405-12,自
备)
2. 将以上处理好的样本溶液300 μl转移至新的1.5 ml离心管中。
3. 加入300 μl裂解液GHL 和300 μl异丙醇,振荡混匀。
4. 加入15 μl磁珠悬浮液GH,振荡混匀1 min,共静置9 min,每3 min振荡混匀1 min。
注意:为了确保磁珠*重悬,请在使用前振荡混匀。
5. 将离心管放置于磁力架上静置30 sec,磁珠*吸附后,小心吸去液体。
G. 唾液样本
1. 取300 μl唾液样品至2 ml离心管中。
2. 加入20 μl Proteinase K溶液和300 μl裂解液GHL,振荡混匀,75℃裂解15 min,期间颠倒
混匀3回,每回3-5次。
注意:当样本数目比较大时,可以把裂解液GHL和Proteinase K预先混合,最好现用现
配。
3. 加入300 μl异丙醇,振荡混匀10 sec。
4. 加入15 μl磁珠悬浮液GH,振荡混匀1 min,共静置9 min,每3 min振荡混匀1 min。
注意:为了确保磁珠*重悬,请在使用前振荡混匀。
5. 将离心管放置于磁力架上静置30 sec,磁珠*吸附后,小心吸去液体。
H. 拭子样本
1. 样本处理:
1) 干拭子样本:样本采集后加入500 μl 组织消化液GHA和20 μl Proteinase K,涡旋10
sec混匀。
2) 含保存液的拭子样本:保存液体积太大的直接取出300 μl至1.5 ml离心管中进行实验,
保存液体积剩余较少的用组织消化液GHA补足至300 μl。加入20 μl Proteinase K,涡
旋10 sec混匀,