豚鼠肝细胞生长因子(HGF)ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法:
1)目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照;与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。
3)以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性;P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑;P/N小于1.5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在豚鼠肝细胞生长因子(HGF)ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下,以期给客户带来一些启发,提高试验质量。
10532 胰岛素(INS)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Insulin (INS) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
10533 胰岛素样生长因子1(IGF1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Insulin Like Growth Factor 1 (IGF1) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
10534 胰岛素样生长因子2(IGF2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Insulin Like Growth Factor 2 (IGF2) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
10535 胰岛素样生长因子结合蛋白3(IGFBP3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Insulin Like Growth Factor Binding Protein 3 (IGFBP3) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
10536 载脂蛋白A2(APOA2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Apolipoprotein A2 (APOA2) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
10537 脂联素(ADP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Adiponectin (ADP) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
10538 肿瘤坏死因子α(TNFα)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Tumor Necrosis Factor Alpha (TNFa) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
10539 脂质转运蛋白(CETP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cholesteryl Ester Transfer Protein (CETP) 48T/96T Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
10540 神经型一氧化氮合酶()检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Nitric Oxide Synthase 1, Neuronal () 48T/96T Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
10541 转化生长因子β1(TGFβ1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Transforming Growth Factor Beta 1 (TGFb1) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
10542 丙酮酸脱氢酶磷酸酶(PDP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Pyruvate Dehydrogenase Phosphatase (PDP) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
10543 α2-纤溶酶抑制因子(α2PI)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Alpha-2-Plasmin Inhibitor (a2PI) 48T/96T Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
10544 Ⅱ型前胶原羧基端原肽(PⅡCP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Procollagen II C-Terminal Propeptide (PIICP) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
10545 60kD热休克蛋白(HSPD1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Heat Shock 60kD Protein 1, Chaperonin (HSPD1) 48T/96T Chicken (Gallus)
10546 90kDa热休克蛋白β1(HSP90β1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Heat Shock Protein 90kDa Beta 1 (HSP90b1) 48T/96T Rhesus monkey (Simian)
10547 B-淋巴细胞激活抗原B7-2(LAB7-2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for B-Lymphocyte Activation Antigen B7-2 (LAB7-2) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
10548 P选择素(SELP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Selectin, Plaet (SELP) 48T/96T Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
10549 α-乳清蛋白(αLA)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Alpha-Lactalbumin (aLA) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
10550 神经介素S(NMS)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Neuromedin S (NMS) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
10551 促卵泡素(FSH)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Follicle Stimulating Hormone (FSH) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10552 促肾上皮质激素释放激素(CRH)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Corticotropin Releasing Hormone (CRH) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10553 促肾上腺皮质激素(ACTH)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Adrenocorticotropic Hormone (ACTH) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10554 促肾上腺皮质激素(ACTH)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Adrenocorticotropic Hormone (ACTH) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
10555 促肾上腺皮质激素(ACTH)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Adrenocorticotropic Hormone (ACTH) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
10556 促甲状腺素释放激素(TRH)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Thyrotropin Releasing Hormone (TRH) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
10557 促生长激素释放激素(GHRH)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Growth Hormone Releasing Hormone (GHRH) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
10558 *释放激素(GnRH)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Gonadotropin Releasing Hormone (GnRH) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10559 催乳素(PRL)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Prolactin (PRL) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
10560 催乳素(PRL)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Prolactin (PRL) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
10561 催乳素(PRL)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Prolactin (PRL) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10562 抵抗素(RETN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Resistin (RETN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10563 抵抗素(RETN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Resistin (RETN) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
10564 抵抗素(RETN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Resistin (RETN) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
10565 多巴胺(DA)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Dopamine (DA) 48T/96T General
10566 蛋白酶激活受体2(PAR2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Protease Activated Receptor 2 (PAR2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10567 胱天蛋白酶8(CASP8)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Caspase 8 (CASP8) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10568 S100钙结合蛋白A11(S100A11)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for S100 Calcium Binding Protein A11 (S100A11) 48T/96T Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
10569 S100钙结合蛋白B(S100B)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for S100 Calcium Binding Protein B (S100B) 48T/96T Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
10570 白介素10(IL10)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Interleukin 10 (IL10) 48T/96T Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
10571 白介素1β(IL1β)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Interleukin 1 Beta (IL1b) 48T/96T Oryctolagus cuniculus豚鼠肝细胞生长因子(HGF)ELISA试剂盒 (Rabbit)
10572 白介素4(IL4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Interleukin 4 (IL4) 48T/96T Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
10573 白介素6(IL6)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Interleukin 6 (IL6) 48T/96T Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因,并给出相应的解决办法:
1 选择试剂:选择质量优良的检测试剂,严格按照试剂说明书进行操作,操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样:可能原因:
1)血清或血浆标本分离不好即进行加样;
2)手工操作中,加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时); 3)加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法:
1) 标本为血清:将血液先自然存放1-2小时后,再用3000rmp离心15分钟;标本为血浆:必须使用含抗凝剂的血液标本收集管,采血后必须立即颠倒*混合5-10次,放置一段时间后,3000rpm离心15分钟;若在几天内检测,可放在2-8℃冰箱中,若要贮存,则置于-20℃的低温冰箱内。
2) 加样后及时放入孵箱。
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自动加样,选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。
5) 标本较多时,请分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育时未贴封片或加盖,使标本或稀释液蒸发,吸附于孔壁,难于清洗*;
2) 孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗*。解决办法:
1) 贴封片或加盖;
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。
2) 采用半自动洗板机洗板时,洗液量不足,导致洗板不*;洗板针堵塞,抽吸不*;洗板不畅,导致洗板效果差。
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法:
1) 保证洗液注满各孔,洗板针畅通,洗完板后在吸水纸(选择干净、无或少尘的吸水材料)上轻轻拍干;
2) 合理安排,或多用几台洗板机。
5豚鼠肝细胞生长因子(HGF)ELISA试剂盒显色:可能原因:
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂;
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法:
1) 显色剂尽量在临用前配制,坚持不用过期显色剂,肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用; 2) 加样时保持显色剂不外流;
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止:可能原因如加终止液时产生较多气泡,导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板:如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化,有效提高检测质量。
在实际操作中,除了选择优良试剂外,必须严格按照操作步骤进行操作,同时作好室内质控、室间质评,以严谨的工作作风检测每一份标本,才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪,这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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