人白介素1α(IL-1α )ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法:
1)目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照;与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。
3)以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性;P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑;P/N小于1.5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在人白介素1α(IL-1α )ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下,以期给客户带来一些启发,提高试验质量。
18458 8-OHdG(Mouse 8-Hydroxy-desoxyguanosine) ELISA Kit 小鼠8羟基脱氧鸟苷 96T
18459 IL1Ra(Mouse Interleukin 1 receptor antagonist) ELISA kit 小鼠白介素1受体拮抗剂 96T
18460 sE-selectin(Human soluble E-selectin) ELISA Kit 人可溶性E选择素 96T
18461 androgen ElISA Kit 大鼠雄激素 96T
18462 sICAM-1(Human Soluble Intercellular Adhesion Molecule-1) ELISA Kit 人可溶性细胞间粘附分子1 96T
18463 TLR4 ELISA Kit 大鼠Toll样受体4 96T
18464 PCT(Mouse Procalcitonin) ELISA Kit 小鼠降钙素原 96T
18465 IAA(Mouse insulin autoantibodies) ELISA Kit 小鼠胰岛素自身抗体 96T
18466 DAT ELISA Kit 大鼠多巴胺转运蛋白 96T
18467 ICAM-2/CD102(Human intercellular adhesion molecule 2) ELISA Kit 人细胞间粘附分子2 96T
18468 ICAM-3/CD50(Human intercellular adhesion molecule 3) ELISA Kit 人细胞间粘附分子3 96T
18469 GP210(Mouse Anti-glucoprotein 210)ELISA Kit 小鼠抗核膜糖蛋白210抗体 96T
18470 D2R ELISA Kit 大鼠多巴胺D2受体 96T
18471 A Beta1-42 ELISA Kit 大鼠β淀粉样蛋白1-42 96T
18472 CTGF(Human connective tissue growth factor) ELISA Kit 人结缔组织生长因子 96T
18473 IL-7(Mouse Interleukin-7) ELISA kit 小鼠白介素7 96T
18474 MT(Mouse Melatonin) ELISA Kit 小鼠褪黑素 96T
18475 IL-18(Human Interleukin 18) ELISA KIT 人白介素18 96T
18476 CD44 ELISA Kit 大鼠CD44分子 96T
18477 8-OHdG ELISA Kit 大鼠8羟基脱氧鸟苷 96T
18478 Apo-H(Mouse Apolipoprotein H) ELISA Kit 小鼠载脂蛋白H 96T
18479 MEC/CCL28(Human mucosae associated epithelia chemokine) ELISA Kit 人粘膜相关上皮趋化因子 96T
18480 IL1Ra ELISA Kit 大鼠白介素1受体拮抗剂 96T
18481 BAFF-R(Human B cell activation factorr from the tumor necrosis factor family receptor) ELISA Kit 人B细胞活化因子受体 96T
18482 HSF1(Mouse Heat Shock Factor 1) ELISA Kit 小鼠热休克因子1 96T
18483 VEGFR-3/Flt-4(Human Vascuoar endothelial cell growth factor receptor 2) ELISA kit 人血管内皮细胞生长因子受体3 96T
18484 IAA ELISA Kit 大鼠胰岛素自身抗体 96T
18485 PF3(Mouse plaet factor 3) ELISA Kit 小鼠血小板因子3 96T
18486 gp210 ELISA Kit 大鼠抗核膜糖蛋白210抗体 96T
18487 IL-2R(Mouse Interleukin-2 receptor) ELISA kit 小鼠白介素2受体 96T
18488 VEGFR-1/Flt1(Human Vascuoar endothelial cell growth factor receptor 1) ELISA kit 人血管内皮细胞生长因子受体1 96T
18489 sTLR6 ELISA Kit 大鼠可溶性Toll样受体6 96T
18490 VEGF-D(Human Vascular Endothelial cell Growth Factor D) ELISA KIT 人血管内皮细胞生长因子D 96T
18491 ADM(Mouse adrenomedullin) ELISA Kit 小鼠肾上腺髓质素 96T
18492 VEGF-C(Human Vascular Endothelial cell Growth Factor C) ELISA KIT 人血管内皮细胞生长因子C 96T
18493 sTLR2 ELISA Kit 大鼠可溶性Toll样受体2 96T
18494 sLR(Mouse Leptin Soluble Receptor) ELISA Kit 小鼠可溶性瘦素受体 96T
18495 VEGF-B(Human Vascular Endothelial cell Growth Factor B) ELISA KIT 人血管内皮细胞生长因子B 96T
18496 PGF2 Alpha ELISA Kit 大鼠前列腺素F2α 96T
18497 Beta-EPR(Mouse Beta-Endorphin receptor) ELISA Kit 小鼠β内啡肽受体 96T
18498 VEGF(Human Vascular Endothelial cell Growth Factor) ELISA KIT 人血管内皮细胞生长因子 96T
18499 LTE4 ELISA Kit 大鼠白三烯E4 96T
18500 HL(Mouse hepatic lipase) ELISA Kit 小鼠肝脂酶 96T
18501 UK ELISA Kit 大鼠* 96T
18502 VCAM-1/CD106(Human Vascuolar cell adhesion molecule 1) ELISA kit 人血管内皮细胞粘附分子1 96T
18503 HBcAb(Mouse hepatitis B virus core antibody) ELISA Kit 小鼠乙型肝炎核心抗体 96T
18504 HBeAb(Mouse hepatitis B virus e antibody) ELISA Kit 小鼠乙型肝炎e抗体 96T
18505 sTRAIL(Human soluble tumor necrosis factor-related apoptosis inducing ligand) ELISA KIT 人可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 96T
18506 F XII ELISA Kit 大鼠*Ⅻ 96T
18507 F X III ELISA Kit 人白介素1α(IL-1α )ELISA试剂盒大鼠*ⅩⅢ 96T
18508 TRAIL-R4(Human tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand 4) ELISA Kit 人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体4 96T
18509 HBeAg(Mouse hepatitis B virus e antigen) ELISA Kit 小鼠乙型肝炎e抗原 96T
18510 TRAIL-R3(Human tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand 3) ELISA Kit 人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体3 96T
下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因,并给出相应的解决办法:
1 选择试剂:选择质量优良的检测试剂,严格按照试剂说明书进行操作,操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样:可能原因:
1)血清或血浆标本分离不好即进行加样;
2)手工操作中,加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时); 3)加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法:
1) 标本为血清:将血液先自然存放1-2小时后,再用3000rmp离心15分钟;标本为血浆:必须使用含抗凝剂的血液标本收集管,采血后必须立即颠倒*混合5-10次,放置一段时间后,3000rpm离心15分钟;若在几天内检测,可放在2-8℃冰箱中,若要贮存,则置于-20℃的低温冰箱内。
2) 加样后及时放入孵箱。
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自动加样,选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。
5) 标本较多时,请分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育时未贴封片或加盖,使标本或稀释液蒸发,吸附于孔壁,难于清洗*;
2) 孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗*。解决办法:
1) 贴封片或加盖;
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。
2) 采用半自动洗板机洗板时,洗液量不足,导致洗板不*;洗板针堵塞,抽吸不*;洗板不畅,导致洗板效果差。
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法:
1) 保证洗液注满各孔,洗板针畅通,洗完板后在吸水纸(选择干净、无或少尘的吸水材料)上轻轻拍干;
2) 合理安排,或多用几台洗板机。
5人白介素1α(IL-1α )ELISA试剂盒显色:可能原因:
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂;
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法:
1) 显色剂尽量在临用前配制,坚持不用过期显色剂,肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用; 2) 加样时保持显色剂不外流;
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止:可能原因如加终止液时产生较多气泡,导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板:如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化,有效提高检测质量。
在实际操作中,除了选择优良试剂外,必须严格按照操作步骤进行操作,同时作好室内质控、室间质评,以严谨的工作作风检测每一份标本,才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪,这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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