人白介素1可溶性受体Ⅰ(IL-1sRⅠ)ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法:
1)目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照;与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。
3)以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性;P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑;P/N小于1.5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在人白介素1可溶性受体Ⅰ(IL-1sRⅠ)ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下,以期给客户带来一些启发,提高试验质量。
18566 NT-3 ELISA Kit 人神经营养因子3 96T
18567 NGF(Human Nerve growth factor) ELISA kit 人的神经生长因子 96T
18568 vaspin ELASA Kit 大鼠内脏脂肪特异性*蛋白酶抑制剂 96T
18569 OFQ/N(Mouse orphanin FQ/nociceptin) ELISA Kit 小鼠孤腓肽 96T
18570 NGF- Beta(Human Nerve growth factor- Beta) ELISA kit 人的神经生长因子-β 96T
18571 MIP-3 Beta/ELC/CCL19(Human Macrophage Inflammatory Protein-3 Beta) ELISA kit 人巨噬细胞炎性蛋白3β 96T
18572 PP(Mouse Protein Phosphatase) ELISA Kit 小鼠蛋白磷酸酶 96T
18573 BrdU ELISA Kit 大鼠溴脱氧核苷* 96T
18574 MIP-3 Alpha/CCL20(Human Macrophage Inflammatory Protein-3 Alpha) ELISA kit 人巨噬细胞炎性蛋白3α 96T
18575 TGF Beta2 ELISA Kit 大鼠转化生长因子β2 96T
18576 TrxR(Mouse thioredoxin reductase) ELISA Kit 小鼠硫氧还蛋白还原酶 96T
18577 Trx(Mouse thioredoxin) ELISA Kit 小鼠硫氧化还原蛋白 96T
18578 MIP-1 Beta/CCL4(Human Macrophage Inflammatory Protein-1 Beta) ELISA kit 人巨噬细胞炎性蛋白1β 96T
18579 CYP2E1 ISA Kit 大鼠细胞色素P4502E1 96T
18580 Alpha1-MG ELISA Kit 大鼠α1微球蛋白 96T
18581 MIP-1 Alpha/CCL3(Human Macrophage Inflammatory Protein-1 Alpha) ELISA kit 人巨噬细胞炎性蛋白1α 96T
18582 Collagenase II(Mouse Collagenase Type II) ELISA Kit 小鼠胶原酶II 96T
18583 Collagenase I(Mouse Collagenase Type I) ELISA Kit 小鼠胶原酶I 96T
18584 MDC/CCL22(Human Macrophage-Derived Chemokine) ELISA kit 人巨噬细胞来源的趋化因子 96T
18585 MCP-4/CCL13 ELISA Kit 大鼠单核细胞趋化蛋白4 96T
18586 PPAR- Alpha ELISA Kit 大鼠过氧化物酶体增殖物激活受体α 96T
18587 M-CSF(Human Macrophage Colony-Stimulating Factor) ELISA kit 人巨噬细胞集落刺激因子 96T
18588 P-PKC(Mouse phospho Protein Kinase C) ELISA Kit 小鼠磷酸化蛋白激酶C 96T
18589 MIC-1 human ELISA kit 人巨噬细胞抑制因子-1 ELISA 试剂盒 96T
18590 MCP-3/CCL7(Human monocyte chemotactic protein 3) ELISA kit 人单核细胞趋化蛋白3 96T
18591 pERK(Mouse phospho-extracellular signal-regulated kinase) ELISA Kit 小鼠磷酸化细胞外信号调节激酶 96T
18592 CAM ELISA Kit 大鼠钙调素 96T
18593 CCB(Mouse calcium channel blockers) ELISA Kit 小鼠钙通道阻滞剂 96T
18594 Apo-E ELISA Kit 大鼠载脂蛋白E 96T
18595 MCP-2/CCL8(Human monocyte chemotactic protein 2) ELISA kit 人单核细胞趋化蛋白2 96T
18596 MCP-1/CCL2/MCAF(Human monocyte chemotactic protein 1/monocyte chemotactic and activating factor) ELISA kit 人单核细胞趋化蛋白1 96T
18597 ALT/GPT(Mouse Alanine Aminotransferase) ELISA Kit 小鼠*转氨酶/谷丙转氨酶 96T
18598 omentin ELISA Kit 大鼠网膜素 96T
18599 BMPs(Mouse bone morphogenetic proteins) ELISA Kit 小鼠骨形成蛋白 96T
18600 Human L-Selectin ELISA kit 人L选择素 96T
18601 OFQ/N ELISA Kit 大鼠孤腓肽 96T
18602 PP ELISA Kit 大鼠蛋白磷酸酶 96T
18603 RBP-4(Mouse Retinol-binding protein 4) ELISA Kit 小鼠*结合蛋白4 96T
18604 IL-9(Human Interleukin 9) ELISA KIT 人白介素9 96T
18605 IL-8/CXCL8(Human Interleukin 8) ELISA KIT 人白介素8 96T
18606 6-keto-PGF1a(Mouse 6-keto-prostaglandin F1a) ELISA Kit 小鼠6酮前列腺素F1a 96T
18607 TrxR ELISA Kit 大鼠硫氧还蛋白还原酶 96T
18608 Trx ELISA Kit 大鼠硫氧化还原蛋白 96T
18609 Pentosidine(Mouse Pentosidine) ELISA Kit 小鼠戊糖素 96T
18610 IL-6(Human Interleukin 6) ELISA KIT 人白介素6 96T
18611 Collagenase II ELISA Kit 人白介素1可溶性受体Ⅰ(IL-1sRⅠ)ELISA试剂盒大鼠胶原酶II 96T
18612 AGEs(Mouse advanced glycation end products) ELISA Kit 小鼠晚期糖基化终末产物 96T
18613 IL-5(Human Interleukin 5) ELISA KIT 人白介素-5 96T
18614 TREM-1 ELISA Kit 大鼠髓系细胞触发受体-1 96T
18615 IL-4(Human Interleukin 4) ELISA KIT 人白介素4 96T
18616 NGAL(Mouse neutrophil gelatinase-associated lipocalin) ELISA Kit 小鼠中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白 96T
下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因,并给出相应的解决办法:
1 选择试剂:选择质量优良的检测试剂,严格按照试剂说明书进行操作,操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样:可能原因:
1)血清或血浆标本分离不好即进行加样;
2)手工操作中,加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时); 3)加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法:
1) 标本为血清:将血液先自然存放1-2小时后,再用3000rmp离心15分钟;标本为血浆:必须使用含抗凝剂的血液标本收集管,采血后必须立即颠倒*混合5-10次,放置一段时间后,3000rpm离心15分钟;若在几天内检测,可放在2-8℃冰箱中,若要贮存,则置于-20℃的低温冰箱内。
2) 加样后及时放入孵箱。
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自动加样,选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。
5) 标本较多时,请分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育时未贴封片或加盖,使标本或稀释液蒸发,吸附于孔壁,难于清洗*;
2) 孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗*。解决办法:
1) 贴封片或加盖;
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。
2) 采用半自动洗板机洗板时,洗液量不足,导致洗板不*;洗板针堵塞,抽吸不*;洗板不畅,导致洗板效果差。
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法:
1) 保证洗液注满各孔,洗板针畅通,洗完板后在吸水纸(选择干净、无或少尘的吸水材料)上轻轻拍干;
2) 合理安排,或多用几台洗板机。
5人白介素1可溶性受体Ⅰ(IL-1sRⅠ)ELISA试剂盒显色:可能原因:
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂;
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法:
1) 显色剂尽量在临用前配制,坚持不用过期显色剂,肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用; 2) 加样时保持显色剂不外流;
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止:可能原因如加终止液时产生较多气泡,导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板:如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化,有效提高检测质量。
在实际操作中,除了选择优良试剂外,必须严格按照操作步骤进行操作,同时作好室内质控、室间质评,以严谨的工作作风检测每一份标本,才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪,这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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