ZC-5013A 牛痘病毒-拓扑异构酶（Topoisomerase I ）试剂盒产品简介：
该Topoisomerase I 来源于牛痘病毒（vaccinia virus），通过基因重组方案制备纯化。其能解旋DNA的超螺旋结构，除此外其能识别并切割双链DNA末端 [5’C(T)CCTT↓]，并且与DNA形成共价连接形成稳定复合物。该共价复合物遇到DNA的5’-OH基团后，重新连接形成完整DNA链。因此，使用Topoisomerase I 酶可作为DNA的连接有效工具。其可用于DNA的载体连接、缺刻修复、接头连接等实验。
应用 ：
组分：
| 名称 | 数量 |
vaccinia Topoisomerase I (20 U/μl) 10×vaccinia TOPOI Buffer | 25 μl/250 μl 1 ml |
DNA-载体连接
缺刻修复
接头连接
活性定义 ：
1单位指在37℃条件下，1h内使1μg超螺旋pUC19 DNA解旋所需要的酶量。
储存 ：-20℃可保存3年。
使用注意事项 ：
（1）1×vaccinia TOPOI Buffer：50mM Tris-acetate (pH 7.5), 100mM NaCl, 2.5mM MgCl2。
（2）该酶的最佳反应温度为37℃。80℃ 20min可使该酶失活。
（3）该酶切割偶联试验时，识别位点[5’C(T)CCTT↓]的3’端碱基数量影响偶联效率。
（4）共价复合物进行DNA分子连接时，底物5’-端需要保留-OH基团。
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