基质胶是从富含胞外基质蛋白的小鼠肿瘤中提取出的天然基底膜基质。主要依次为层粘连蛋白(Laminin)、IV型胶原蛋白(Col-IV)、巢蛋白(Entactin)、硫酸乙酰肝素蛋白多糖(Heparan sulphate proteoglycans)及多种细胞因子,如类胰岛素生长因子(IGF-1)、转化生长因子β(TGF-β)、血管内皮生长因子(VEGF)、表皮生长因子(EGF)、成纤维细胞生长因子(bFGF)等。产品溶解于高糖无酚红DMEM中,且非定制产品均添加了50μg/mL。
推荐应用
模基生物低生长因子无酚红基质胶适用于需要避免颜色干扰,减少生长因子诱导的背景信号的,对基底膜制备要求较高的研究应用。
基质胶分装使用方法
模基生物低生长因子无酚红基质胶主要有四种使用方式,我们将为您提供这四种使用方式的的一般操作程序,您可以基于您的实验目的选择合适的使用方式。
方式一:薄层凝胶
1.方法:
①产品解冻后,适当混匀,或根据实验需求使用预冷的培养基稀释,建议浓度不低于1mg/mL;
②向细胞培养板表面加入50μL/cm²基质胶,平铺均匀,注意避免产生气泡;
③将培养板放置在 37 ℃,等待30 min形成凝胶即可使用,必要时,吸去上清。
2.适用:细胞在薄层基质凝胶顶部扩增
3.主要应用:细胞迁移和侵袭、原代细胞扩增
方式二:薄层包被
1.方法:
①产品解冻后,适当混匀,根据实验需求使用预冷的培养基稀释,建议浓度不低于0.1mg/mL;
②吸取适量体积稀释液移液,覆盖细胞培养板表面,摇匀,建议包被量为0.01-0.02mg/cm²;
③将培养板放置在 37 ℃,孵育至少1h,吸去上清即可使用。
2.适用:细胞附着在薄层基底膜表面扩增
3.主要应用:原代细胞扩增
方式三:厚层凝胶
1.方法:
①产品解冻后,适当混匀,或根据实验需求使用预冷的培养基稀释,建议基质胶占比 > 67%;
②向细胞培养板表面加入150-200μL/cm²基质胶,平铺均匀,注意避免产生气泡;
③将培养板放置在 37 ℃,等待30 min形成凝胶即可使用。
2.适用:细胞在厚层基质凝胶上形成三维结构
3.主要应用:体外血管生成、主动脉环
方式四:凝胶包埋
1.方法:
①产品提前解冻备用;
②准备所需的细胞,用基质胶重悬,建议基质胶占比>70%;
③向细胞培养板表面加入15-20μL/cm²,注意避免产生气泡;
④将培养板放置在 37 ℃,30 min形成包裹细胞的凝胶,向培养板内添加合适的培养基。
2.适用:细胞在基质胶内扩增、发育
3.主要应用:类器官培养、肿瘤球状体侵袭
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