产品及特点

Y 染色体上 95%是男性特异区域，里面含和男性有关的基因。SRY 基因

（Sex-determining Region on Y Chromosome ，SRY），雄性的性别决定基因，指 Y 染色体上具体决定生物雄性性别的基因片段。人的 SRY 基因位于 Yp11.3，只含有一个外显子，没有内含子，转录单位长约 1.1kb，编码一个 204 氨基酸的蛋白质。本产品是根据 PCR 原理开发，它具有下列特点：

• 即开即用，用户只需要提供 DNA 模板。

2. 引物经过精心优化，专一性强，只扩增 SRY 基因。

3. 提供阳性对照，便于区分假阴性样品。

4. PCR mix 中含上样染料，PCR 后可以直接上样电泳。

5. 本试剂盒足够做 40μL 体系的 PCR 50 次，但只能用于科研。

规格及成分

成 份

编号

十孔盒包装

PCR MagicMix 3.0

90805

1 mL（红盖）

超纯水

100935

1 mL（亮黄色）

人 Y 染色体性别决定区

（SRY）PCR 引物混合液

13-190901yw

100 μL（白盖）

人 Y 染色体性别决定区

（SRY）PCR 阳性对照

（1×10E8 拷贝/μL）

60908-190901pc

50 μL（黄盖）

使用手册

13-190901sc

1 份

运输及保存

低温运输，-20℃保存，保存期限为一年。阳性对照需要单独放置，不要污染其

他试剂。

自备试剂

样品 DNA。

使用方法

一、样品 DNA 的制备

• 用自选方法纯化 N+2 个样品的 DNA，本试剂盒跟市场上大多数核酸提取试剂盒兼容。
• 如果有 N 个样品，则需要做 N+2 个提取，包括一个样品制备阳性对照和一个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是在适量水（取决于试剂盒要求的样品起始量）中加 10μL 人 Y 染色体性别决定区（SRY）PCR 阳性对照的 100 倍稀释液而得，样品制备阴性对照是直接用水。提取结束后最后得到模板 DNA 放冰上待用。

二、设置PCR 反应（40μL 体系）

• 对 N+2 个样品，在PCR 时需要增加一个 PCR 阳性对照和一个 PCR 阴性对照，故需要设置 N+4 个反应。在 N+4 个PCR 管中分别加入下列成分：

成分

N+2 个

样品管

PCR 阴性

对照

PCR 阳性

对照

PCR Magic Mix 3.0

各 20 μL

20 μL

20 μL

人 Y 染色体性别决定区

（SRY）PCR 引物混合液

各 2 μL

2 μL

2 μL

N+2 个样品 DNA 模板

各 18 μL

-

-

PCR 阴性对照（水）

-

18 μL

-

PCR 阳性对照（人 Y 染色体性别决定区（SRY） PCR 阳性对照的 100 倍

稀释液）

-

-

18 μL

4. 按下表设置 PCR 反应：

三、电泳检测

• 取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix 在扩增结束后可以直接上样，不需要另外再加 loading buffer。PCR 产物阳性对照必须有 232bp 大小的条带出现，阴性对照必须无任何扩增，否则实验无效。对没有扩增产物的样品，可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排除PCR 抑制剂的感染。

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