罗氏沼虾诺达病毒(MrNV)ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法:
1)目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照;与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。
3)以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性;P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑;P/N小于1.5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在罗氏沼虾诺达病毒(MrNV)ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下,以期给客户带来一些启发,提高试验质量。
14411 Rhotekin 2蛋白(RTKN2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Rhotekin 2 (RTKN2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14412 N-α-乙酰转移酶30(NαA30)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for N-Alpha-Acetyltransferase 30 (NaA30) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14413 Notchless蛋白(NLE)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Notchless (NLE) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14414 Rho蛋白2(RHPN2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Rhophilin 2 (RHPN2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14415 *脱氢酶13(RDH13)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Retinol Dehydrogenase 13 (RDH13) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14416 *脱氢酶14(RDH14)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Retinol Dehydrogenase 14 (RDH14) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14417 腺苷酸激酶7(AK7)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Adenylate Kinase 7 (AK7) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14418 连接蛋白4(JPH4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Junctophilin 4 (JPH4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14419 核糖核酸酶A9(RNASE9)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Ribonuclease A9 (RNASE9) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14420 Anoctamin 9蛋白(ANO9)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Anoctamin 9 (ANO9) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14421 N-去乙酰化酶/磺基转移酶4(NDST4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for N-Deacetylase/N-Sulfotransferase 4 (NDST4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14422 Clarin 3蛋白(CLRN3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Clarin 3 (CLRN3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14423 转位因子蛋白2(TSPO2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Translocator Protein 2 (TSPO2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14424 半椎蛋白2(HMCN2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Hemicentin 2 (HMCN2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14425 Akirin 2蛋白(AKIRIN2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Akirin 2 (AKIRIN2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14426 亲核素α7(KPNα7)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Karyopherin Alpha 7 (KPNa7) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14427 泛核蛋白2(UBN2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Ubinuclein 2 (UBN2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14428 钠/葡萄糖协同转运蛋白4(SGLT4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Sodium/Glucose Cotransporter 4 (SGLT4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14429 肌腱蛋白N(TNN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Tenascin N (TNN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14430 蛋白O-葡萄糖基转移酶1(POGLUT1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Protein O-Glucosyltransferase 1 (POGLUT1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14431 N-乙酰转移酶9(NAT9)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for N-Acetyltransferase 9 (NAT9) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14432 钠/葡萄糖协同转运蛋白5(SGLT5)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Sodium/Glucose Cotransporter 5 (SGLT5) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14433 *组合因子2(SERINC2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Serine Incorporator 2 (SERINC2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14434 外核苷酸焦磷酸酶/磷酸二酯酶6(ENPP6)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Ectonucleotide Pyrophosphatase/Phosphodiesterase 6 (ENPP6) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14435 脂肪酶K(LIPK)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Lipase K (LIPK) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14436 脂肪酶N(LIPN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Lipase N (LIPN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14437 脂肪酶M(LIPM)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Lipase M (LIPM) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14438 CopineⅧ蛋白(CPNE8)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Copine VIII (CPNE8) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14439 Paladin蛋白(PALD)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Paladin (PALD) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14440 环氧化合物水解酶4(EPHX4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Epoxide Hydrolase 4 (EPHX4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14441 环氧化合物水解酶3(EPHX3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Epoxide Hydrolase 3 (EPHX3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14442 磷脂酶D4(PLD4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Phospholipase D4 (PLD4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14443 Serrate蛋白(SRRT)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Serrate (SRRT) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14444 突触囊泡蛋白ⅩⅦ(SYT17)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Synaptotagmin XVII (SYT17) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14445 酵母氨酸脱氢酶(SCCPDH)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Saccharopine Dehydrogenase (SCCPDH) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14446 CopineⅨ蛋白(CPNE9)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Copine IX (CPNE9) 48T/96T Homo sapiens罗氏沼虾诺达病毒(MrNV)ELISA试剂盒 (Human)
14447 N-α-乙酰转移酶35(NαA35)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for N-Alpha-Acetyltransferase 35 (NaA35) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14448 Tectonic 3蛋白(TCTN3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Tectonic 3 (TCTN3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因,并给出相应的解决办法:
1 选择试剂:选择质量优良的检测试剂,严格按照试剂说明书进行操作,操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样:可能原因:
1)血清或血浆标本分离不好即进行加样;
2)手工操作中,加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时); 3)加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法:
1) 标本为血清:将血液先自然存放1-2小时后,再用3000rmp离心15分钟;标本为血浆:必须使用含抗凝剂的血液标本收集管,采血后必须立即颠倒*混合5-10次,放置一段时间后,3000rpm离心15分钟;若在几天内检测,可放在2-8℃冰箱中,若要贮存,则置于-20℃的低温冰箱内。
2) 加样后及时放入孵箱。
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自动加样,选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。
5) 标本较多时,请分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育时未贴封片或加盖,使标本或稀释液蒸发,吸附于孔壁,难于清洗*;
2) 孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗*。解决办法:
1) 贴封片或加盖;
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。
2) 采用半自动洗板机洗板时,洗液量不足,导致洗板不*;洗板针堵塞,抽吸不*;洗板不畅,导致洗板效果差。
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法:
1) 保证洗液注满各孔,洗板针畅通,洗完板后在吸水纸(选择干净、无或少尘的吸水材料)上轻轻拍干;
2) 合理安排,或多用几台洗板机。
5罗氏沼虾诺达病毒(MrNV)ELISA试剂盒显色:可能原因:
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂;
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法:
1) 显色剂尽量在临用前配制,坚持不用过期显色剂,肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用; 2) 加样时保持显色剂不外流;
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止:可能原因如加终止液时产生较多气泡,导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板:如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化,有效提高检测质量。
在实际操作中,除了选择优良试剂外,必须严格按照操作步骤进行操作,同时作好室内质控、室间质评,以严谨的工作作风检测每一份标本,才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪,这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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