改良O157显色培养基使用说明书

组分

科玛嘉O157显色培养基一瓶，添加剂A和B各一支。

琼脂 15.0 g/L   蛋白胨和酵母粉 13.0 g/L   色素1.2 g/L

pH值 6.9±0.2℃

操 作
1、取瓶内干粉29.2g溶于1000mL去离子水的洁净三角瓶中，充分搅拌混匀。也可根据需要按照29.2 g/L的比例扩大或缩小制备培养基的量。

2、加热至100℃，不停搅拌，使其*溶解。切勿加热超过100℃，切勿121℃高压灭菌。若使用微波炉加热，应将培养基加热沸腾，立即移出，轻轻摇匀，再放入微波炉加热，观察小气泡变为大气泡，直至*溶解即可。切勿使培养基溢出。
3、加热后的培养基冷却至45℃~50℃，轻轻地摇动均匀，倾注平皿，使其凝固，晾干备用。

对于污染较为严重的样品，使用添加剂可增强CHROMagar O157显色培养基的选择性：

       在添加剂A中加入1ml无菌水，在添加剂B中加入1ml 95%乙醇，轻轻摇动或放置于37℃水浴中，待内容物全部溶解方可使用。然后以无菌操作分别加入到冷却至45℃~50℃的培养基中，轻轻混匀。（添加剂A、B各1ml，用于1000ml培养基，可按比例放大或缩小，剩余的添加剂可以保存在-20℃冰箱中，有效期为半年）。

保存  该成品平板在室温可保存一天或在冰箱内贮存2周（2℃~8℃，避光）。

接种

划线或涂布接种（冰箱内保存的平板使用前应恢复至室温），在36

±1℃恒温条件下有氧培养18-24h。

结果

性能及局限

   大肠杆菌O157灵敏度为98%（Bettelheim et al. 1998）。但缺乏亚碲酸钾时，各种非大肠杆菌O157菌株可以出现相同颜色的菌落（如沙门氏菌）。建议通过乳胶试验验证可疑菌落。大肠杆菌O157的鉴定需要做血清学实验。

贮存条件

干粉需保存于15℃~30℃干燥环境中，在有效期前使用。

污染处理

使用过的培养基需要在121℃灭菌至少20分钟才可以按照有关规定丢弃。

附：供体外诊断使用，产品须专业人员操作。