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荧光定量PCR实验步骤：
1、总RNA抽提（枪头和离心管均经过湿热灭菌，无RNA酶）
1）取匀浆器，加入1ml的Trizol Reagent，置冰上预冷。
2）取100mg组织，加入到匀浆器中。
3）充分研磨直至无可见组织块。
4）13000g离心10min取上清。
5）加入250 μl，颠倒离心管15s，充分混匀，静置3min。
6）4℃下13000g离心8min。
7）将上清转移到一新的离心管中，加入0.8倍体积的异丙醇，颠倒混匀。
8）-20℃放置15min。
9）4℃下13000g离心10min，管底的白色沉淀即为RNA。
10）吸除液体，加入75%乙醇1.5ml洗涤沉淀。
11）4℃下13000g离心5min。
12）将液体吸除干净，将离心管置于超净台上吹3min。
13）加入20μl无RNA酶的水溶解RNA。
14）55℃孵育5min。
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