琼脂包埋 上海茁彩检测服务,用琼脂在温度高于50℃时熔化、而低于此温度时则凝固的特性,将其溶于水后与微生物混合,然后冷却凝固或滴入非水相溶液中,从而制成固定化微生物。其特点是包埋微生物活性较高,制作较容易。缺点是氧和底物及产物的扩散受到限制,琼脂凝胶的机械强度较差,且成球受温度影响较大。
以琼脂为载体,建立包埋固定化微生物细胞的方法如下。
琼脂包埋方法I
①将琼脂加热溶于水,冷却至45—50℃;
②使琼脂溶液与微生物细胞混合均匀,琼脂的zui终浓度为3%;
③将琼脂与微生物细胞的混合液倒入已灭菌的培养皿中,使之冷却凝固;
④将凝胶切成3mm×3mm×3mm的小方块,用生理盐水洗净,备用。
琼脂包埋方法Ⅱ
①将琼脂加热溶于水,冷却至45—50℃;
②将琼脂溶液与微生物细胞混合均匀,琼脂的zui终浓度为3%;
③在常温条件下(45—50℃),将琼脂与微生物细胞混合物用针形管滴入上层是液体石蜡、下层是水的量筒中;
④滤出固定化细胞颗粒,用生理盐水洗净,备用。
方法Ⅲ
①将按方法Ⅱ制得的固定化细胞颗粒在下列溶液中浸泡30min;
ACAM 7.5% BIS 0.4%
TEMED 0.5% VC 2.0%
②滤出固定化颗粒,加入到0.8%K2S2O4溶液中,在缓速搅拌下放置30min
③滤出固定化颗粒,用生理盐水洗净,备用
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