兔子可溶性P选择素(sP-selectin)ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法:
1)目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照;与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。
3)以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性;P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑;P/N小于1.5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在兔子可溶性P选择素(sP-selectin)ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下,以期给客户带来一些启发,提高试验质量。
8731 结合珠蛋白(Hpt)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Haptoglobin (Hpt) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8732 结合珠蛋白(Hpt)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Haptoglobin (Hpt) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
8733 结合珠蛋白(Hpt)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Haptoglobin (Hpt) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
8734 结合珠蛋白(Hpt)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Haptoglobin (Hpt) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
8735 血清淀粉样蛋白A(SAA)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Serum Amyloid A (SAA) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8736 血清淀粉样蛋白A(SAA)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Serum Amyloid A (SAA) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
8737 血清淀粉样蛋白A(SAA)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Serum Amyloid A (SAA) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
8738 花生四烯酸-15-脂加氧酶(ALOX15)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Arachidonate-15-Lipoxygenase (ALOX15) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8739 花生四烯酸-15-脂加氧酶(ALOX15)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Arachidonate-15-Lipoxygenase (ALOX15) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
8740 花生四烯酸-15-脂加氧酶(ALOX15)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Arachidonate-15-Lipoxygenase (ALOX15) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
8741 多功能肽酶2(LMP2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Large Multifunctional Peptidase 2 (LMP2) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
8742 多功能肽酶2(LMP2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Large Multifunctional Peptidase 2 (LMP2) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
8743 神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Glial Fibrillary Acidic Protein (GFAP) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8744 神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Glial Fibrillary Acidic Protein (GFAP) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
8745 神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Glial Fibrillary Acidic Protein (GFAP) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
8746 神经介素B(NMB)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Neuromedin B (NMB) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8747 神经介素B(NMB)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Neuromedin B (NMB) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
8748 神经介素B(NMB)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Neuromedin B (NMB) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
8749 *(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for C Reactive Protein (CRP) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
8750 *(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for C Reactive Protein (CRP) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
8751 过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Peroxisome Proliferator Activated Receptor Gamma (PPARg) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8752 过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Peroxisome Proliferator Activated Receptor Gamma (PPARg) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
8753 过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Peroxisome Proliferator Activated Receptor Gamma (PPARg) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
8754 *Ⅱ(F2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Coagulation Factor II (F2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8755 干扰素α(IFNα)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Interferon Alpha (IFNa) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
8756 Apelin 12蛋白(AP12)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Apelin 12 (AP12) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8757 Apelin 12蛋白(AP12)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Apelin 12 (AP12) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
8758 前列腺素E受体2(EP2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Prostaglandin E Receptor 2 (EP2) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
8759 前列腺素E受体2(EP2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Prostaglandin E Receptor 2 (EP2) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
8760 甲状旁腺激素相关蛋白(PTHrP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Parathyroid Hormone Related Protein (PTHrP) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8761 甲状旁腺激素相关蛋白(PTHrP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Parathyroid Hormone Related Protein (PTHrP) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
8762 甲状旁腺激素相关蛋白(PTHrP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Parathyroid Hormone Related Protein (PTHrP) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
8763 丙酮酸脱氢酶磷酸酶(PDP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Pyruvate Dehydrogenase Phosphatase (PDP) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8764 丙酮酸脱氢酶磷酸酶(PDP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Pyruvate Dehydrogenase Phosphatase (PDP) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
8765 胱天蛋白酶8(CASP8)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Caspase 8 (CASP8) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
8766 胱天蛋白酶8(CASP8)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Caspase 8 (CASP8) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
8767 蛋白酶激活受体2(PAR2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Protease Activated Receptor 2 (PAR2) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
8768 蛋白酶激活受体2(PAR2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Protease Activated Receptor 2 (PAR2) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
8769 高铁血红蛋白还原酶(MHBR)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Methemoglobin Reductase (MHBR) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
8770 补体成分3(C3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Complement Component 3 (C3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8771 补体成分3(C3)检测试剂盒兔子可溶性P选择素(sP-selectin)ELISA试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Complement Component 3 (C3) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
8772 补体成分3(C3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Complement Component 3 (C3) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因,并给出相应的解决办法:
1 选择试剂:选择质量优良的检测试剂,严格按照试剂说明书进行操作,操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样:可能原因:
1)血清或血浆标本分离不好即进行加样;
2)手工操作中,加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时); 3)加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法:
1) 标本为血清:将血液先自然存放1-2小时后,再用3000rmp离心15分钟;标本为血浆:必须使用含抗凝剂的血液标本收集管,采血后必须立即颠倒*混合5-10次,放置一段时间后,3000rpm离心15分钟;若在几天内检测,可放在2-8℃冰箱中,若要贮存,则置于-20℃的低温冰箱内。
2) 加样后及时放入孵箱。
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自动加样,选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。
5) 标本较多时,请分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育时未贴封片或加盖,使标本或稀释液蒸发,吸附于孔壁,难于清洗*;
2) 孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗*。解决办法:
1) 贴封片或加盖;
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。
2) 采用半自动洗板机洗板时,洗液量不足,导致洗板不*;洗板针堵塞,抽吸不*;洗板不畅,导致洗板效果差。
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法:
1) 保证洗液注满各孔,洗板针畅通,洗完板后在吸水纸(选择干净、无或少尘的吸水材料)上轻轻拍干;
2) 合理安排,或多用几台洗板机。
5兔子可溶性P选择素(sP-selectin)ELISA试剂盒显色:可能原因:
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂;
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法:
1) 显色剂尽量在临用前配制,坚持不用过期显色剂,肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用; 2) 加样时保持显色剂不外流;
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止:可能原因如加终止液时产生较多气泡,导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板:如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化,有效提高检测质量。
在实际操作中,除了选择优良试剂外,必须严格按照操作步骤进行操作,同时作好室内质控、室间质评,以严谨的工作作风检测每一份标本,才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪,这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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