兔子Ⅰ型前胶原羧基端肽(PⅠCP)ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法:
1)目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照;与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。
3)以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性;P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑;P/N小于1.5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在兔子Ⅰ型前胶原羧基端肽(PⅠCP)ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下,以期给客户带来一些启发,提高试验质量。
8773 嗜中性粒细胞胞浆因子2(NCF2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Neutrophil Cytosolic Factor 2 (NCF2) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
8774 嗜中性粒细胞胞浆因子2(NCF2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Neutrophil Cytosolic Factor 2 (NCF2) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
8775 克拉拉细胞蛋白16(CC16)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Clara Cell Protein 16 (CC16) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8776 克拉拉细胞蛋白16(CC16)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Clara Cell Protein 16 (CC16) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
8777 克拉拉细胞蛋白16(CC16)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Clara Cell Protein 16 (CC16) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
8778 表面活性物质关联蛋白A(SPA)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Surfactant Associated Protein A (SPA) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8779 表面活性物质关联蛋白A(SPA)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Surfactant Associated Protein A (SPA) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
8780 表面活性物质关联蛋白A(SPA)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Surfactant Associated Protein A (SPA) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
8781 甲状旁腺素受体2(PTHR2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Parathyroid Hormone Receptor 2 (PTHR2) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
8782 甲状旁腺素受体2(PTHR2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Parathyroid Hormone Receptor 2 (PTHR2) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
8783 蛋白激酶Cε(PKCε)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Protein Kinase C Epsilon (PKCe) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8784 蛋白激酶Cε(PKCε)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Protein Kinase C Epsilon (PKCe) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
8785 蛋白激酶Cε(PKCε)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Protein Kinase C Epsilon (PKCe) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
8786 膜联蛋白A5(ANXA5)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Annexin A5 (ANXA5) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
8787 膜联蛋白A5(ANXA5)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Annexin A5 (ANXA5) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
8788 肾素(REN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Renin (REN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8789 肾素(REN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Renin (REN) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
8790 肾素(REN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Renin (REN) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
8791 肾素(REN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Renin (REN) 48T/96T Canis familiaris; Canine (Dog)
8792 补体成分4(C4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Complement Component 4 (C4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8793 补体成分4(C4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Complement Component 4 (C4) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
8794 补体成分4a(C4a)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Complement Component 4a (C4a) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
8795 神经肽S(NPS)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Neuropeptide S (NPS) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8796 神经肽S(NPS)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Neuropeptide S (NPS) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
8797 神经肽S(NPS)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Neuropeptide S (NPS) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
8798 淋巴细胞趋化因子(Lptn)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Lymphotactin (Lptn) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8799 淋巴细胞趋化因子(Lptn)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Lymphotactin (Lptn) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
8800 淋巴细胞趋化因子(Lptn)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Lymphotactin (Lptn) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
8801 颗粒酶A(GZMA)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Granzyme A (GZMA) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8802 颗粒酶A(GZMA)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Granzyme A (GZMA) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
8803 颗粒酶A(GZMA)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Granzyme A (GZMA) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
8804 颗粒酶B(GZMB)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Granzyme B (GZMB) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8805 颗粒酶B(GZMB)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Granzyme B (GZMB) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
8806 颗粒酶B(GZMB)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Granzyme B (GZMB) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
8807 髓过氧化物酶(MPO)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Myeloperoxidase (MPO) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8808 髓过氧化物酶(MPO)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Myeloperoxidase (MPO) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
8809 髓过氧化物酶(MPO)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Myeloperoxidase (MPO) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
8810 过氧化物酶体生物合成因子2(PEX2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Peroxisomal Biogenesis Factor 2 (PEX2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8811 过氧化物酶体生物合成因子2(PEX2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Peroxisomal Biogenesis Factor 2 (PEX2) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
8812 过氧化物酶体生物合成因子2(PEX2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Peroxisomal Biogenesis Factor 2 (PEX2) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
8813 食欲素A(OXA)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Orexin A (OXA) 48T/96T Rattus norvegicus兔子Ⅰ型前胶原羧基端肽(PⅠCP)ELISA试剂盒 (Rat)
8814 白介素2(IL2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Interleukin 2 (IL2) 48T/96T Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因,并给出相应的解决办法:
1 选择试剂:选择质量优良的检测试剂,严格按照试剂说明书进行操作,操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样:可能原因:
1)血清或血浆标本分离不好即进行加样;
2)手工操作中,加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时); 3)加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法:
1) 标本为血清:将血液先自然存放1-2小时后,再用3000rmp离心15分钟;标本为血浆:必须使用含抗凝剂的血液标本收集管,采血后必须立即颠倒*混合5-10次,放置一段时间后,3000rpm离心15分钟;若在几天内检测,可放在2-8℃冰箱中,若要贮存,则置于-20℃的低温冰箱内。
2) 加样后及时放入孵箱。
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自动加样,选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。
5) 标本较多时,请分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育时未贴封片或加盖,使标本或稀释液蒸发,吸附于孔壁,难于清洗*;
2) 孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗*。解决办法:
1) 贴封片或加盖;
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。
2) 采用半自动洗板机洗板时,洗液量不足,导致洗板不*;洗板针堵塞,抽吸不*;洗板不畅,导致洗板效果差。
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法:
1) 保证洗液注满各孔,洗板针畅通,洗完板后在吸水纸(选择干净、无或少尘的吸水材料)上轻轻拍干;
2) 合理安排,或多用几台洗板机。
5兔子Ⅰ型前胶原羧基端肽(PⅠCP)ELISA试剂盒显色:可能原因:
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂;
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法:
1) 显色剂尽量在临用前配制,坚持不用过期显色剂,肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用; 2) 加样时保持显色剂不外流;
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止:可能原因如加终止液时产生较多气泡,导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板:如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化,有效提高检测质量。
在实际操作中,除了选择优良试剂外,必须严格按照操作步骤进行操作,同时作好室内质控、室间质评,以严谨的工作作风检测每一份标本,才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪,这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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