兔子*Ⅱ(FⅡ)ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法：
1)目测定性法：加入底物经酶解和终止反应后，肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照；与阴性对照的颜色接近者，判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2～3SD，作为阳性结果的阈值。
3)以P／N值(阳性孔OD值／阴性孔OD值)大于或等于2．1为阳性；P／N值小于2．1，但大于1．5为可疑；P／N小于1．5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在兔子*Ⅱ(FⅡ)ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下，以期给客户带来一些启发，提高试验质量。

8990 促胰液素(SCT)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Secretin (SCT) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8991 促胰液素受体(SCTR)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Secretin Receptor (SCTR) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8992 ⅡD组磷脂酶A2(PLA2G2D)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Phospholipase A2, Group IID (PLA2G2D) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8993 S100钙结合蛋白A13(S100A13)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for S100 Calcium Binding Protein A13 (S100A13) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8994 通用转录因子ⅡH肽1(GTF2H1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for General Transcription Factor IIH, Polypeptide 1 (GTF2H1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8995 S100钙结合蛋白A12(S100A12)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for S100 Calcium Binding Protein A12 (S100A12) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8996 70kDa热休克蛋白1A(HSPA1A)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Heat Shock 70kDa Protein 1A (HSPA1A) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8997 70kDa热休克蛋白9(HSPA9)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Heat Shock 70kDa Protein 9 (HSPA9) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8998 甘丙肽(GAL)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Galanin (GAL) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8999 线粒体超氧化物歧化酶(SOD2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Superoxide Dismutase 2, Mitochondrial (SOD2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9000 肠碱性磷酸酶(ALPI)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Alkaline Phosphatase, Intestinal (ALPI) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9001 早期生长应答因子4(EGR4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Early Growth Response Protein 4 (EGR4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9002 35kDa核孔蛋白(NUP35)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Nucleoporin 35kDa (NUP35) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9003 37kDa核孔蛋白(NUP37)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Nucleoporin 37kDa (NUP37) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9004 *S转移酶κ1(GSTκ1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Glutathione S Transferase Kappa 1 (GSTk1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9005 *S转移酶π1(GSTπ1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Glutathione S Transferase Pi (GSTp) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9006 肝肾骨碱性磷酸酶(ALPL)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Alkaline Phosphatase, Liver/Bone/Kidney (ALPL) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9007 骨涎蛋白(BSP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Bone Sialoprotein (BSP) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9008 *ⅩⅢA1肽(F13A1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Coagulation Factor XIII A1 Polypeptide (F13A1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9009 脑指蛋白(BFP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Brain Finger Protein (BFP) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9010 核基质蛋白4(NMP4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Nuclear Matrix Protein 4 (NMP4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9011 胎儿肾钙黏蛋白(KCAD)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cadherin, Fetal Kidney (KCAD) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9012 花生四烯酸(AA)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Arachidonic Acid (AA) 48T/96T General
9013 低密度脂蛋白(LDL)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Low Density Lipoprotein (LDL) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9014 肌细胞生成素(MYOG)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Myogenin (MYOG) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9015 85kDa核孔蛋白(NUP85)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Nucleoporin 85kDa (NUP85) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9016 107kDa核孔蛋白(NUP107)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Nucleoporin 107kDa (NUP107) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9017 中性粒细胞碱性磷酸酶(NAP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Neutrophil Alkaline Phosphatase (NAP) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9018 甲胎蛋白异质体1(αFPL1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Alpha-Fetoprotein Lens Culinaris Agglutinin 1 (aFPL1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9019 甲胎蛋白异质体2(αFPL2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Alpha-Fetoprotein Lens Culinaris Agglutinin 2 (aFPL2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9020 成纤维细胞生长因子23(FGF23)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Fibroblast Growth Factor 23 (FGF23) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9021 CCAAT增强子结合蛋白γ(CEBPγ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for CCAAT/Enhancer Binding Protein Gamma (CEBPg) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9022 补体1q(C1q)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Complement 1q (C1q) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9023 *Ⅴ(F5)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Coagulation Factor V (F5) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9024 *Ⅴ(F5)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Coagulation Factor V (F5) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
9025 *ⅩⅢ(F13)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Coagulation Factor XIII (F13) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9026 *ⅩⅢ(F13)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Coagulation Factor XIII (F13) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
9027 *Ⅻ(F12)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Coagulation Factor XII (F12) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9028 *Ⅻ(F12)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Coagulation Factor XII (F12) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
9029 免疫球蛋白G(IgG)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Immunoglobulin G (IgG) 48T/96T Cavia (Guinea pig )
9030 三叶因子2(TFF2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Trefoil Factor 2 (TFF2) 48T/96T Homo sapiens兔子*Ⅱ(FⅡ)ELISA试剂盒 (Human)
9031 三叶因子2(TFF2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Trefoil Factor 2 (TFF2) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)

下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因，并给出相应的解决办法：
1 选择试剂：选择质量优良的检测试剂，严格按照试剂说明书进行操作，操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样：可能原因： 
1）血清或血浆标本分离不好即进行加样； 
2）手工操作中，加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时)； 3）加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法： 
1） 标本为血清：将血液先自然存放1-2小时后，再用3000rmp离心15分钟；标本为血浆：必须使用含抗凝剂的血液标本收集管，采血后必须立即颠倒*混合5-10次，放置一段时间后，3000rpm离心15分钟；若在几天内检测，可放在2-8℃冰箱中，若要贮存，则置于-20℃的低温冰箱内。 
2) 加样后及时放入孵箱。 
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自动加样，选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。 
5) 标本较多时，请分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育时未贴封片或加盖，使标本或稀释液蒸发，吸附于孔壁，难于清洗*； 
2) 孵育时间人为延长，导致非特异性结合紧附于反应孔周围，难以清洗*。解决办法： 
1) 贴封片或加盖； 
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。 
2) 采用半自动洗板机洗板时，洗液量不足，导致洗板不*；洗板针堵塞，抽吸不*；洗板不畅，导致洗板效果差。 
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法： 
1) 保证洗液注满各孔，洗板针畅通，洗完板后在吸水纸（选择干净、无或少尘的吸水材料）上轻轻拍干； 
2) 合理安排，或多用几台洗板机。
5兔子*Ⅱ(FⅡ)ELISA试剂盒显色：可能原因： 
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂； 
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法： 
1) 显色剂尽量在临用前配制，坚持不用过期显色剂，肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用； 2) 加样时保持显色剂不外流； 
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止：可能原因如加终止液时产生较多气泡，导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板：如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化，有效提高检测质量。
在实际操作中，除了选择优良试剂外，必须严格按照操作步骤进行操作，同时作好室内质控、室间质评，以严谨的工作作风检测每一份标本，才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪，这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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