绵羊白介素1(IL-1)ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法:
1)目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照;与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。
3)以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性;P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑;P/N小于1.5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在绵羊白介素1(IL-1)ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下,以期给客户带来一些启发,提高试验质量。
13561 成纤维细胞激活蛋白α(FAPα)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Fibroblast Activation Protein Alpha (FAPa) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13562 NFKB抑制因子(NKRF)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for NFKB Repressing Factor (NKRF) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13563 饥饿素-O-乙酰基转移酶(GOAT)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Ghrelin-O-Acyltransferase (GOAT) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13564 胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Thymic Stromal Lymphopoietin (TSLP) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13565 **脂酰转移酶(LCAT)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Lecithin Cholesterol Acyltransferase (LCAT) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13566 CREB结合蛋白(CREBBP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for CREB Binding Protein (CREBBP) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13567 膜铁转运蛋白(FPN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Ferroportin (FPN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13568 Dickkopf相关蛋白1(DKK1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Dickkopf Related Protein 1 (DKK1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13569 白介素6受体(IL6R)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Interleukin 6 Receptor (IL6R) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13570 分泌型卷曲相关蛋白1(SFRP1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Secreted Frizzled Related Protein 1 (SFRP1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13571 嗜酸性粒细胞过氧化物酶(EPX)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Eosinophil Peroxidase (EPX) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13572 双肾上腺皮质激素(DCX)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Doublecortin (DCX) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13573 肝配蛋白B受体3(EPHB3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Ephrin Type B Receptor 3 (EPHB3) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13574 肌微管素相关蛋白9(MTMR9)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Myotubularin Related Protein 9 (MTMR9) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13575 转化受体电位阳离子通道亚家族M成员4(TRPM4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Transient Receptor Potential Cation Channel Subfamily M, Member 4 (TRPM4) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13576 复制启动因子1(REPIN1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Replication Initiator 1 (REPIN1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13577 复制启动因子1(REPIN1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Replication Initiator 1 (REPIN1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13578 核因子相关κB结合蛋白(NFRkB)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Nuclear Factor Related To Kappa B Binding Protein (NFRkB) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13579 Discs大同源物关联蛋白5(DLGAP5)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Discs, Large Homolog Associated Protein 5 (DLGAP5) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13580 转录激活因子3(ATF3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Activating Transcription Factor 3 (ATF3) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13581 无翅型MMTV整合位点家族成员5B(WNT5B)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Wingless Type MMTV Integration Site Family, Member 5B (WNT5B) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13582 含动力蛋白重链域蛋白1(DNHD1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Dynein Heavy Chain Domain Containing Protein 1 (DNHD1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13583 唾液酸结合Ig样凝集素8(SIGLEC8)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Sialic Acid Binding Ig Like Lectin 8 (SIGLEC8) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13584 异粘蛋白(MTDH)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Metadherin (MTDH) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13585 促肾上腺皮质素释放激素受体2(CRHR2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Corticotropin Releasing Hormone Receptor 2 (CRHR2) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13586 乙酰*乙酰转移酶2(ACAT2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Acetyl Coenzyme A Acetyltransferase 2 (ACAT2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13587 线粒体甘油-3-磷酸酰基转移酶(GPAM)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Glycerol-3-Phosphate Acyltransferase, Mitochondrial (GPAM) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13588 炭疽热毒素受体2(ANTXR2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Anthrax Toxin Receptor 2 (ANTXR2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13589 丝裂原激活蛋白激酶激酶激酶6(MAP3K6)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Mitogen Activated Protein Kinase Kinase Kinase 6 (MAP3K6) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13590 血管生成素样蛋白4(ANGPTL4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Angiopoietin Like Protein 4 (ANGPTL4) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13591 血管生成素样蛋白3(ANGPTL3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Angiopoietin Like Protein 3 (ANGPTL3) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13592 再生蛋白1(NEO1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Neogenin 1 (NEO1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13593 铁蛋白(FE)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Ferritin (FE) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13594 过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Peroxisome Proliferator Activated Receptor Gamma (PPARg) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
13595 钠/钾离子转运ATP酶β3肽(ATP1β3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for ATPase, Na+/K+ Transporting Beta 3 Polypeptide (ATP1b3) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13596 儿茶酚-O-甲基转移酶(COMT)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Catechol-O-Methyltransferase (COMT) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13597 神经突蛋白1(NRN1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Neuritin 1 (NRN1) 48T/96T Rattus norvegicus绵羊白介素1(IL-1)ELISA试剂盒 (Rat)
13598 血小板激活因子(PAF)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Plaet Activating Factor (PAF) 48T/96T Rhesus monkey (Simian)
13599 Pim-1原癌基因(PIM1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Pim-1 Oncogene (PIM1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因,并给出相应的解决办法:
1 选择试剂:选择质量优良的检测试剂,严格按照试剂说明书进行操作,操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样:可能原因:
1)血清或血浆标本分离不好即进行加样;
2)手工操作中,加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时); 3)加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法:
1) 标本为血清:将血液先自然存放1-2小时后,再用3000rmp离心15分钟;标本为血浆:必须使用含抗凝剂的血液标本收集管,采血后必须立即颠倒*混合5-10次,放置一段时间后,3000rpm离心15分钟;若在几天内检测,可放在2-8℃冰箱中,若要贮存,则置于-20℃的低温冰箱内。
2) 加样后及时放入孵箱。
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自动加样,选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。
5) 标本较多时,请分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育时未贴封片或加盖,使标本或稀释液蒸发,吸附于孔壁,难于清洗*;
2) 孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗*。解决办法:
1) 贴封片或加盖;
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。
2) 采用半自动洗板机洗板时,洗液量不足,导致洗板不*;洗板针堵塞,抽吸不*;洗板不畅,导致洗板效果差。
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法:
1) 保证洗液注满各孔,洗板针畅通,洗完板后在吸水纸(选择干净、无或少尘的吸水材料)上轻轻拍干;
2) 合理安排,或多用几台洗板机。
5绵羊白介素1(IL-1)ELISA试剂盒显色:可能原因:
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂;
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法:
1) 显色剂尽量在临用前配制,坚持不用过期显色剂,肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用; 2) 加样时保持显色剂不外流;
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止:可能原因如加终止液时产生较多气泡,导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板:如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化,有效提高检测质量。
在实际操作中,除了选择优良试剂外,必须严格按照操作步骤进行操作,同时作好室内质控、室间质评,以严谨的工作作风检测每一份标本,才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪,这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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