绵羊白介素2(IL-2)ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法:
1)目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照;与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。
3)以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性;P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑;P/N小于1.5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在绵羊白介素2(IL-2)ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下,以期给客户带来一些启发,提高试验质量。
13397 载脂蛋白F(APOF)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Apolipoprotein F (APOF) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13398 5羟色胺转运蛋白(SERT)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Serotonin Transporter (SERT) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13399 全*合酶(HCCS)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Holocytochrome C Synthase (HCCS) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13400 *脱羧酶1(GAD1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Glutamate Decarboxylase 1, Brain (GAD1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13401 Cerberus蛋白(CER)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cerberus (CER) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13402 *合成酶(GS)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Glutamine synthetase (GS) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13403 cGMP依赖性蛋白激酶Ⅰ(PRKG1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Protein Kinase, cGMP Dependent Type I (PRKG1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13404 胞质分裂作用因子3(DOCK3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Dedicator Of Cytokinesis 3 (DOCK3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13405 输出蛋白5(XPO5)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Exportin 5 (XPO5) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13406 胰岛素样生长因子结合蛋白7(IGFBP7)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Insulin Like Growth Factor Binding Protein 7 (IGFBP7) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13407 性别决定区Y框蛋白9(SOX9)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Sex Determining Region Y Box Protein 9 (SOX9) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13408 驱动蛋白家族成员20A(KIF20A)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Kinesin Family, Member 20A (KIF20A) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13409 含IQ基元GTP酶激活蛋白2(IQGAP2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for IQ Motif Containing GTPase Activating Protein 2 (IQGAP2) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13410 酸性葡糖苷酶α(GαA)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Glucosidase Alpha, Acid (GaA) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13411 Podocin蛋白(PDCN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Podocin (PDCN) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13412 激肽原1(KNG1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Kininogen 1 (KNG1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13413 肿瘤坏死因子配体超家族成员4(TNFSF4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Tumor Necrosis Factor Ligand Superfamily, Member 4 (TNFSF4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13414 白细胞免疫球蛋白样受体亚家族B成员4(LILRB4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Leukocyte Immunoglobulin Like Receptor Subfamily B, Member 4 (LILRB4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13415 细胞粘附分子1(CADM1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cell Adhesion Molecule 1 (CADM1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13416 核纤层蛋白A/C(LMNA)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Lamin A/C (LMNA) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13417 肝配蛋白B受体3(EPHB3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Ephrin Type B Receptor 3 (EPHB3) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13418 醛脱氢酶3家族成员A1(ALDH3A1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Aldehyde Dehydrogenase 3 Family, Member A1 (ALDH3A1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13419 转化受体电位阳离子通道亚家族M成员4(TRPM4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Transient Receptor Potential Cation Channel Subfamily M, Member 4 (TRPM4) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13420 Klothoβ蛋白(KLβ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Klotho Beta (KLb) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13421 多配体蛋白聚糖3(SDC3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Syndecan 3 (SDC3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13422 乳腺癌抗雌激素药物耐药性基因1(BCAR1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Breast Cancer Anti Estrogen Resistance 1 (BCAR1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13423 肌微管素相关蛋白9(MTMR9)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Myotubularin Related Protein 9 (MTMR9) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13424 皮肤桥蛋白(DPT)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Dermatopontin (DPT) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13425 双肾上腺皮质激素(DCX)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Doublecortin (DCX) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13426 *丰富糖蛋白(HRG)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Histidine Rich Glycoprotein (HRG) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13427 含MOCO硫化酶羧基端域蛋白1(MOSC1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for MOCO Sulphurase C-Terminal Domain Containing Protein 1 (MOSC1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13428 含MANSC域蛋白1(MANSC1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for MANSC Domain Containing Protein 1 (MANSC1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13429 利钠肽受体2(NPR2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Natriuretic Peptide Receptor 2 (NPR2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13430 碳酸酐酶Ⅳ(CA4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Carbonic Anhydrase IV (CA4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13431 对氧磷酶3(PON3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Paraoxonase 3 (PON3) 48T/96T Homo sapiens绵羊白介素2(IL-2)ELISA试剂盒 (Human)
13432 血管非炎性蛋白3(VNN3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Vanin 3 (VNN3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13433 脂素1(LPIN1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Lipin 1 (LPIN1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因,并给出相应的解决办法:
1 选择试剂:选择质量优良的检测试剂,严格按照试剂说明书进行操作,操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样:可能原因:
1)血清或血浆标本分离不好即进行加样;
2)手工操作中,加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时); 3)加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法:
1) 标本为血清:将血液先自然存放1-2小时后,再用3000rmp离心15分钟;标本为血浆:必须使用含抗凝剂的血液标本收集管,采血后必须立即颠倒*混合5-10次,放置一段时间后,3000rpm离心15分钟;若在几天内检测,可放在2-8℃冰箱中,若要贮存,则置于-20℃的低温冰箱内。
2) 加样后及时放入孵箱。
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自动加样,选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。
5) 标本较多时,请分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育时未贴封片或加盖,使标本或稀释液蒸发,吸附于孔壁,难于清洗*;
2) 孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗*。解决办法:
1) 贴封片或加盖;
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。
2) 采用半自动洗板机洗板时,洗液量不足,导致洗板不*;洗板针堵塞,抽吸不*;洗板不畅,导致洗板效果差。
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法:
1) 保证洗液注满各孔,洗板针畅通,洗完板后在吸水纸(选择干净、无或少尘的吸水材料)上轻轻拍干;
2) 合理安排,或多用几台洗板机。
5绵羊白介素2(IL-2)ELISA试剂盒显色:可能原因:
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂;
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法:
1) 显色剂尽量在临用前配制,坚持不用过期显色剂,肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用; 2) 加样时保持显色剂不外流;
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止:可能原因如加终止液时产生较多气泡,导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板:如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化,有效提高检测质量。
在实际操作中,除了选择优良试剂外,必须严格按照操作步骤进行操作,同时作好室内质控、室间质评,以严谨的工作作风检测每一份标本,才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪,这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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